陽離子脂質(lipoplexes)和聚合物(polyplexes)是常用的非病毒基因遞送系統。 Tee 技術(觸發內體逃逸)結合并利用了兩個實體的特性,以實現極其有效的核酸遞送到細胞中。事實上,新一代脂多胺含有親脂部分(例如脂質)和帶電多胺部分(例如陽離子聚合物)。這些部分協同作用,確保緊密的核酸壓縮和保護以及內體膜非常有效的去穩定,從而允許在胞質溶膠中釋放大量核酸并攝取DNA核。特別關注可生物降解實體的合成。這樣,轉染試劑不會干擾細胞機制,每次實驗都能保持高細胞活力,并避免任何潛在的副作用。
轉染效率與高轉基因表達水平或高基因沉默以及最小化細胞毒性相結合取決于多個關鍵參數。這些因素包括細胞類型、質粒 DNA 特征(大小、啟動子、報告基因)和純度、siRNA 序列和純度、細胞培養條件(含或不含血清的培養基、細胞數量、無污染……)、核酸和試劑的量、轉基因測定僅舉幾例。因此,需要根據待遞送的核酸(DNA、siRNA、mRNA、ODN、shRNA 等)和所使用的細胞類型專門設計轉染試劑,以達到最佳效率。
脂轉染法特別適用于永生化細胞。
Tee 技術的主要優勢是:
納米顆粒中 DNA 的壓縮被細胞有效內化
保護核酸免遭核酸酶降解
高效的膜去穩定和 DNA 遞送
即使核酸含量低也能高效
生物降解性
該協議是一個非常簡單的過程:
1. 準備 DNA 和試劑溶液。
2. 將它們混合在一起并孵育 20 分鐘。
3. 添加到您的單元格中。