1.PNA具有較高的親和力和特異性。2.富含嘌呤的PNA低聚物的溶解度降低,并傾向于聚集。建議低聚物的嘌呤含量低于50%,在PNA夾中一個低聚物的嘌呤(特別是G堿段不超過6段),因為水溶性非常重要。可以添加兩個賴氨酸來提高長PNA或具有高嘌呤的PNA的溶解度。存儲和處理1.PNA...
用熒光疊氮化物探針通過CuAAC可視化炔烴標記的生物分子的一個主要缺點反應是需要去除未反應的熒光探針。當對細胞內環境、活體組織成像或對體內生物分子進行可視化時,這尤其成問題。去除所有未反應的熒光探針的困難也是背景信號和非特異性結合的主要原因之一。為了克服這一缺點,CarolynBertozzi小組設計了熒光疊氮化物探針,通過銅催化或無金屬點擊化學。這些疊氮化物探針在與炔烴反應之前不具有熒光性。已終止在CalFluor中,這些探針具有從綠色到遠紅色波長的發射最大值,并且能夠實現...
銅螯合配體設計的最新進展,例如作為穩定Cu(I)氧化態的THPTA或BTTAA水溶液,提高銅催化的動力學疊氮-炔環加成(CuAAC)反應和大大提高炔烴檢測的靈敏度。銅螯合配體也顯示出增加生物相容性CuAAC反應通過防止銅離子引起生物損害1。改進CuAAC的下一步反應是發展銅螯合疊氮化合物作為更多反應底物。因為據推測疊氮化銅締合是CuAAC催化過程中的限速步驟環2,在疊氮化物上引入銅螯合部分報告分子可以顯著提高有效的Cu(I)在反應部位的濃度,增強最弱環節中的反應速率加速(圖2...
通過吸收光,染料分子進入電子激發狀態。在這種情況下,吸收的能量僅存儲很短的時間,并在激發態的生命周期后再次輻射,例如熒光。在染料溶液中,激發的染料分子(可視為點偶極子或振蕩器)如果它們之間的距離足夠大,則不會相互影響。因此,集合中存在的發色團的吸收和熒光不會改變。在發色團之間的平均距離約為5-10nm處,影響僅通過振蕩器的“輻射場”發生,即沒有直接接觸。例如,通過染料分子的模型證明了兩個染料分子之間的這種相互作用。福斯特共振能量轉移(FRET)描述。如果發色團之間的距離變得更...
熒光壽命的測定吸收光后,分子在釋放吸收的能量之前保持一定時間的電子激發態。在這里,不同的光化學過程以不同的概率相互競爭。除了無輻射失活外,還可以發射光,例如以熒光的形式。之后激發分子數(n1)已降至1/e的系數(約37%),稱為熒光壽命(τ佛羅里達州):n1(t)=n1(0)e(-t/τ佛羅里達州)有機染料的衰減行為可以用來識別它。然而,熒光壽命(熒光衰減時間)不是一個固定的量,而是受染料所處環境即溶劑和溫度的影響。ATTO染料的熒光壽命通常在納秒范圍內(10-9秒)。對于我...
光的吸收除了在部分或透明的物質上發生折射、散射、干涉和衍射現象外,還可以產生一種顏色印象,如彩虹、蔚藍的天空、閃閃發光的肥皂泡、華麗的孔雀羽毛或薄薄的油膜和層,顏色主要通過光的吸收或反射出現在我們的環境中。物質的“色彩”是通過選擇性吸收來自電磁輻射光譜的可見部分的光而產生的。這個范圍介于紫外線和紅外光之間。在分子水平上,這意味著分子進入電子激發態:通過吸收光量子(光子),電子從占據的最高分子軌道上移走(HOMO=h最遠o被占用m耳目o比妥;能源E1)進入最di的未占用分子軌道...
除了熒光的光譜位置外,熒光量子產率(ηfl;英文fluorescencequantumyfield,QY)是熒光團的一個重要光學參數。除了消光系數的大小,當染料用作熒光標記時,量子產率的水平特別決定了獲得的信號強度:因此在英語用法中,消光系數和量子產率的乘積被稱為作為熒光團的“亮度”。量子產率本質上取決于染料的分子結構,但也受到許多外部因素的影響。這些包括環境的溫度、粘度、極性和pH值。這種環境可以由溶劑分子和任何溶劑組成,也可以由例如偶聯的生物分子或細胞膜組成,熒光染料位于...